Yugi Mutou
Yugi é o personagem principal da série e é também a reencarnação do grande faraó Yami Yugi, ele é um grande jogador de Monstros de Duelo. A sua vida mudou a partir da hora em que ele conseguiu resolver o Enigma do Milênio (uma das sete Relíquias do Milênio), dado por seu avô. Há também uma antiga profecia que diz que aquele que conseguisse resolver o Enigma do Milênio seria o escolhido para assumir a árdua tarefa de salvar o mundo.
Yami Yugi
Yami Yugi é o espírito aprisionado no Enigma do Milênio e que tomou posse do corpo de Yugi Mutou após ele ter resolvido o Enigma. Yami passa a controlar o corpo de Yugi toda vez que ele participa do Monstros de Duelo. Tudo indica que Yami é na verdade o grande faraó que aprisionou o poder do Jogo das Trevas a 5.000 anos e que o seu verdadeiro nome seja Yu-Gi-Oh.
Joey Wheeler
Joey é o melhor amigo de Yugi e o segundo melhor duelista. Joey aprendeu a jogar Monstros de Duelo com Salomon e com seu amigo Yugi, mas ele era um fracasso. Seu desempenhou melhorou quando conseguiu uma vaga no reino dos duelistas com a ajuda de Yugi e adquiriu ótimas cartas tornando-se um grande duelista. Joey entrou no campeonato de Monstros de Duelo pra ganhar o dinheiro de prêmio para pagar uma operação para sua irmã, Serenity, pois soube que ela iria ficar cega.
Téa Gardner
Téa é um dos integrantes do quarteto de Yugi e a única menina. Téa ficou amiga do grupo quando Yugii a salvou de um bandido que tentou assaltá-la. Téa é uma garota bastante calma, por isso ela duelo só por diversão sendo assim uma duelista fraca. Téa sempre tenta ajudar Yugi quando ele precisa, e tem uma certa queda pelo herói.
Tristan Taylor
Tristan tem o mesmo jeito largado, desleixado e engraçado de seu amigo Joey. No começo não ia muito com a cara de Yugi, mas com o tempo eles se deram bem. Ele faz parte do quarteto: Yugi, Joey, Téa e Tristan. Dos quatro, ele é o que menos entende de Monstros de Duelo.
Shadi
Shadi é o guardião das Relíquias do Milênio e possui duas delas: a Balança do Milênio e a Chave do Milênio. Foi ele quem deu o Olho do Milênio ao Pegasus, pois como ele próprio disse: "o destino escolheu Maximillion Pegasus pra usar a relíquia". Como se pode perceber Shadi é um personagem muito importante na história de Yu-Gi-Oh, trazendo muitas surpresas a série.
Seto Kaiba e dragão luminoso
Seto Kaiba é o grande campeão mundial de Monstros de Duelo, mas acaba derrotado logo no primeiro episódio por Yugi mesmo com o seu baralho com três dragões brancos de olhos azuis. Além de ser o campeão mundial, Seto é famoso por ser o dono da Corporação Kaiba, que fabrica arenas holográficas para se jogar Monstros de Duelo, a segunda industria mais importante neste ramo só perdendo para a Ilusões Industriais que é a empresa do Maximillion Pegasus.
Maximillion Pegasus
Dono da empresa Ilusões Industriais e portador do Olho do Milênio, Maximillion Pegasus é o vilão da primeira temporada de Yu-Gi-Oh!. Pegasus criou o jogo Monstros de Duelo após ter descoberto o Jogo das Trevas através do Olho do Milênio. Tudo isso com o objetivo de conseguir reunir o maior número de Relíquias do Milênio para reviver a sua falecida esposa Cecelia combinando o poder desses artefatos com a tecnologia da Corporação Kaiba.
Bakura Ryou
Bakura é um dos personagens mais misteriosos da série, ele tem aparições estranhas desde o começo até ficar amigo do quarteto de Yugi. O mistério de Bakura é devido o Anel do Milênio, que guarda um espírito de um ladrão que viveu a vários séculos, e agora quer reunir todas as Relíquias do Milênio. Isto faz com que Bakura aja de modo estranho, pois o anel o afeta, mesmo sendo uma boa pessoa. Bakura ganhou o Anel do Milênio de seu pai, um pesquisador que comprou o artefato em uma feira egípcia.
Mai Valentine
Mai é uma grande duelista, porém mesquinha e arrogante. Uma trapaceira que logo no começo da série aparece fingindo ser uma médium para enganar os heróis. Com o tempo ela acaba ficando amiga do quarteto, principalmente depois de Yugi ter salvado ela de Panic (um dos eliminadores do reino dos duelistas).
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